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Product classification
糖原系列
糖異生系列
其他系列
信號系列
土壤系列
離子系列
淀粉系列
蛋白酶系列
蔗糖系列
線粒體呼吸鏈系列
抗逆系列
抗氧系列
氧化系列
P450系列
糖代謝系列
脂肪酸代謝系列
酯酶系列
TCA系列
三羧酸循環系列
氮代謝系列
輔酶II 系列
谷胱甘肽系列
蛋白含量測定系列
糖酵解系列
維生素c代謝系列
過氧化氫系列
氨基酸代謝系列
ATP系列
輔酶I系列
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全蛋白提取試劑盒（中）用于哺乳動物組織和細胞中提取總蛋白，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑，作用較為溫和，可快速獲得總蛋白，可用于免疫印跡實驗等基礎研究實驗，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。產品組成:
規格
儲存條件
裂解液（中）
100 ml
2-8 oC
磷酸酶抑制劑（100x）
1ml
-20 oC
蛋白酶抑制劑（100x）
1 ml
PMSF（100x）
操作方法:
1、組織總蛋白的提取在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；吸取上清至新的管中；進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復凍融，避免長時間儲存。)2、細胞總蛋白的提取裂解液的用量：107個細胞需要裂解液1ml；貼壁細胞：棄去培養基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細胞裂解液；在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞，將刮離的細胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min懸浮細胞：4 oC 400g離心收集細胞，用冷的PBS洗兩次細胞，同樣按細胞數加入裂解液，渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復3-4次；裂解完畢之后，將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min；將上清移入新的EP管中；進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復凍融，避免長時間儲存。)注意事項：實驗過程，所有試劑都要需要預冷或者即融，保證操作過程中的低溫環境；PSMF（有毒）現用現加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；
備注：以上數據均來自公開文獻, Solarbio暫未進行獨立驗證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.
地 址：上海市欽江路15號14層郵 箱：solarbio
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