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梯度降溫凍存盒在恢復(fù)室溫的操作方法
更新時(shí)間：2023-05-24 | 點(diǎn)擊率：4483
梯度降溫凍存盒是一種用于保存生物樣本的容器，在進(jìn)行快速冷凍凍存后，需要采取適當(dāng)措施以使樣本在恢復(fù)到室溫時(shí)不受損害。它能夠?qū)悠房焖俚亟禍氐降蜏貭顟B(tài)，從而有效地延長(zhǎng)樣品的保存時(shí)間。
下面是操作方法：
1.取出凍存盒：將凍存盒從液氮罐中取出，放置于室溫下的平坦表面上。
2.開(kāi)啟蓋子：打開(kāi)盒蓋，并迅速將樣本轉(zhuǎn)移到預(yù)先準(zhǔn)備好的接受樣本的容器中。如果樣本數(shù)量眾多，可以使用專門(mén)的樣本細(xì)胞解凍架，方便快捷。
3.漸進(jìn)恢復(fù)溫度：在室溫下將容器中的樣本緩慢升溫至4℃，這個(gè)過(guò)程需要盡可能的緩慢，時(shí)間要求約為30分鐘左右。
4.洗滌：在緩慢升溫的同時(shí)，可以進(jìn)行一定的洗滌過(guò)程，以去除掉DNase、RNase等雜質(zhì)或污染。
5.細(xì)胞培養(yǎng)基底液：在恢復(fù)溫度后，可以選擇加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)基底液進(jìn)行培養(yǎng)以修復(fù)凍存造成的細(xì)胞損傷，具體添加量可以根據(jù)樣本的情況而定。
6.培養(yǎng)條件：經(jīng)過(guò)緩慢升溫和培養(yǎng)基底液的加入后，可將樣本置于恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。注意要控制好培養(yǎng)條件，如CO2濃度、濕度等。
總之，使用梯度降溫凍存盒保存生物樣本是一種常見(jiàn)的方法。在快速冷凍過(guò)程中，應(yīng)盡可能減少樣本受損害的風(fēng)險(xiǎn)，并且在恢復(fù)到室溫時(shí)采取適當(dāng)?shù)臐u進(jìn)恢復(fù)溫度的操作方法，以確保凍存樣本的完整性和穩(wěn)定性。